近年来，金针菇工厂化栽培在各地迅速发展。在福建，采用再生法栽培模式，厂家都实行自行制作菌种。菌种生产程序通常分为母种、原种、栽培种3个层次，其制作过程包括培养基配制、接种、菌丝培养等。在制种过程中，培养基灭菌和接种操作等不规范都容易造成污染，掌握好菌种制作技术是控制污染的关键。笔者从事金针菇菌种生产已有多年，其污染率控制在2%以内，现将制作技术介绍如下。

　　1. 母种的制作

　　1.1 品种选择

　　目前市场皆以纯白色品种为主，宜选用抗病性强，产量高，朵型好，基部绒毛少的品种，如8801，8909等。

　　1.2 培养基配制

　　选用25×200mm试管做栽培容器。常用配方为：去皮马铃薯225g，葡萄糖20g，琼脂20g，硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾1g，蛋白胨0.75g，维生素B2两片，水1000ml，酸碱度自然。将马铃薯切成条放入水中煮熟，用四层纱布过滤取汁。然后加入琼脂，搅拌使之充分溶化，再加入其他药品并搅拌至溶解，移入漏斗中，分装到试管中，容量为管长1／5，塞上棉花球。用手提高压灭菌锅灭菌，压力0.05Mpa时排放冷空气，在0.12～0.15MPa压力下灭菌30min，降压至0.05MPa以下，出锅，排放斜面，斜面长度占试管长度2／3为宜，待冷却凝固后方可使用。

　　1.3 转管与培养

　　用甲醛10ml加高锰酸钾5g熏蒸消毒30min，戴好口罩，戴上手套，用2～3%来苏儿溶液擦洗消毒，然后入箱接种。将母种试管口火燎一下，接种针在75%酒精浸后火焰灼烧冷却后，伸入试管切分斜面母种，使之成5×5mm的小块；挑取一小块带培养基的母种，接入试管培养基斜面上，火燎管口，塞上棉花球。接种完毕后，放置于培养箱中，温度为20℃，培养14～16d菌丝可布满整个斜面。菌丝培养时应做到天天查菌，及时剔除污染菌、可疑菌。

　　2. 原种的制作

　　2.1 培养基配制

　　栽培容器选用750ml玻璃瓶。配方：棉籽壳50%，麦麸24%，木屑、蔗渣共24%，轻质碳酸钙1%，玉米芯1%，含水量60%。棉籽壳在混合前拌水预湿，料全部混合搅拌好后装瓶。将料填入瓶子，使之达到瓶肩，料面压实、压平，然后将瓶壁上的培养料用清水洗净，竖置于周转筐内。用圆形木棒插入瓶内，沿瓶口旋转，形成一个欲留孔穴，旋出木棒，塞上棉花球。用卧式高压灭菌锅灭菌，由锅炉提供蒸汽。排放两次冷空气，0.15～0.18MPa压力下灭菌3h，降压、出锅，冷却至25℃以下方可接种。

　　2.2 接种与培养

　　母种用来苏儿溶液擦洗后放置于接种箱内，第一箱用甲醛加高锰酸钾熏蒸消毒，从第二箱开始及接下来的几箱都可用气雾消毒盒（剂）8～12 g消毒，消毒30min后方可接种。用接种针稍微刮掉斜面上的菌丝，将斜面母种分成六小块；瓶口靠近火焰，用接种针把小块的培养基再分成成一个小块和一个大块，并勾入菌瓶内，塞上棉花球。接种完毕后，进行摇瓶，使小块的掉入孔穴中，大块的在培养料上面。放置于温度为20℃菌种培养房中，培养25～30d菌丝可走满整个菌瓶。

　　3. 栽培种的制作

　　3.1 培养基配制

　　栽培种采用17.5×40×5cm聚丙烯塑料袋。棉籽壳45%，麦麸30%，木屑、蔗渣共21%，轻质碳酸钙1%，过磷酸钙1%，玉米芯2%，含水量65%。料搅拌好后进行装袋，将料填入袋子，用拇指和食指将料从袋底角塞入袋内，插上圆形木棒，沿棒四周将袋内料压紧，填至袋内料高14～15cm，旋出木棒，套上套环，塞上棉花球，竖置于周转筐内，移入常压灭菌锅灶进行灭菌。压力0.3t以上为宜，温度升至 100℃以上保持13h以上。出炉，冷却至25℃以下。

　　3.2 接种与培养

　　将已用来苏儿溶液擦洗的原种放置于接种箱内，消毒方法跟原种接种时的消毒方法一样；接种铲消毒，原种瓶口火燎，挖掉表面的老菌块并搅碎瓶内的菌种，铲2～3铲菌种移入菌袋内，塞上棉花球。接种完毕后，出箱，排放于培养库。培养库温度控制在20℃左右，相对湿度维持在65～70%为宜，暗光培养，菌丝生长后期每天适当进行通风。菌丝基本长满菌袋后进行催蕾，培养库温度降至16～14℃，每天适当开灯，约10～15天即可长出针尖菇，待针尖菇布满菌袋80%，长度4～6cm左右应及时开袋，拔去套环和棉花球，刈掉料面以上的塑料袋膜，移至6～8℃的出菇房进行培养。

　　4.金针菇母种的保藏

　　采用低温保藏。把斜面长满菌丝的菌种放在4℃冰箱中，每隔3个月移植1次。转管次数控制在10次以内，以免菌种生活力下降，影响菇的产量、质量。