人工培育蛹虫草时,先将蛹虫草菌接种于培养基上,形成大量的分生孢子,再挑取分生孢子用无菌水制成孢子悬浊液,接种于宿主即蛹体上,保护蛹体直至僵硬。然后将僵硬的蛹体放在模拟蛹虫草自然生态条件下培养,从蚕蛹中长出的子座便同野生蚕蛹长的一模一样。具体操作如下:
1.菌株的筛选 将蛹虫草通过活的蛹体进行复壮,进而筛选出对蚕蛹致病力强、易形成孢子的菌株。
2.孢子悬浊液的制作 菌株接种于培养基上,置20℃温度下培养,待出现分生孢子后,挑取一部分放在无菌水内制成孢子悬浊液待用。
3.宿主准备 将家蚕或蓖麻蚕上簇后烟熏消毒。一周后剖茧取蛹,剔除病蛹和不良蛹,选发育时期的健康蛹作宿主,也可直接选取上簇前的五龄蚕作宿主。
4.蛹虫草菌的感染 用接种针针尖蘸孢子悬浊液刺入蛹体,感染成功率可在95%以上。
5.感染蛹体的保护 染菌后的蛹体平摊于蚕匾或竹席上,室温下保护至蛹体僵硬。
6.子座的培育 模拟蛹虫草的自然生态环境,培养僵硬的蛹体长出于座。方法是在僵硬的蛹体上覆盖一层多孔材料,如碎海绵、细煤渣等,置于室温下、空气相对湿度为90%的环境中培养。
7.子座的定向培养 为使生出的子座长而硬,可采用定向培养。方法是,将僵硬的蛹头向上,插入多孔保温的材料如海绵中,放在前述温湿度及光照条件下培养。
8.蛹虫草的收集保存 子座成熟后,挖出清洗,用食用酒进行体表消毒,再放在60℃环境下烘干,置阴凉干燥处密封保存。