1  菌种选择与制作

　　1.1  菌种选择

　　可选择经笔者试验筛选出来的圆芝8号、大红芝等菌株。

　　1.2  母种制作

　　配方：①PDA培养基：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂18～23g；②改良PDA培养基：PDA培养基+蛋白胨2g；③改良PDA培养基Ⅱ：PDA培养基+蛋白胨1g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1g。各配方，水1000ml，pH自然。

　　按常规方法配制，马铃薯煮汁过滤，琼脂溶化，其他物品溶解，趁热分装到18mm×180mm玻璃试管，塞上棉花塞（或硅胶试管塞），采用高压灭菌，在0.11Mpa（121℃）下灭菌30min，自然冷却后趁热摆斜面，斜面凝固后进行无菌检验。在超净工作台中按无菌操作规范接种，取灵芝母种5mm2左右大小的菌块，接入培养基斜面中央，然后放置于20～25℃的培养箱中培养，菌丝10～15d可布满整个试管。

　　1.3  原种制作

　　配方：①棉籽壳78%、麸皮20%；②枇杷枝屑78%、麸皮20%；③枇杷枝屑58%、棉籽壳20%、麸皮20%。各配方，辅料：石灰1%、红糖0.5%、过钙0.5%，料水比=1:1.2，含水量60.0%左右。选用新鲜、干燥、无霉变、无虫蛀的枇杷枝，粉碎备用（下同）。

　　棉籽壳在混合前拌水预湿，料全部混合搅拌好后装瓶。选用750ml玻璃瓶，装料至瓶肩（每瓶干料重150g左右），料面压实、压平，瓶壁上的培养料用清水洗净。中间打孔，以棉花塞封口。采用卧式高压灭菌锅灭菌，0.11MPa压力（121℃）下灭菌2h，自然冷却。压力指示降至零后，微开门，让余热烘干棉塞[7]。出锅冷却至25℃以下方可接种，移入接种箱，用气雾消毒剂熏蒸消毒30min，然后按无菌操作规范接种，每支母种可接3～5瓶。培养室温度一般为20～25℃，空气相对湿度60～70%，菌丝20～25d可布满整个菌瓶。制作好的原种直接用于接种栽培袋。

　　2  栽培袋制作

　　2.1  装袋和灭菌

　　配方：①枇杷枝屑88%，麸皮10%；②枇杷枝屑70%、玉米芯18%，麸皮10%；③枇杷枝屑50%、棉籽壳20%、玉米芯18%，麸皮10%。各配方，辅料：石灰1%、红糖0.5%、过钙0.5%，料水比=1:1.5，含水量65.0%左右。

　　玉米芯用石灰水浸泡12～14h，棉籽壳在混合前拌水预湿，料搅拌好后进行装袋，采用17.5cm×40cm×0.005cm聚丙烯塑料袋装料，把料装入袋内，插上圆形木棒，沿棒四周将袋内料压紧，装料高15cm（每袋干料重400g左右），旋出木棒，以套环和棉花塞封口。采用高压灭菌时，压力达到0.11Mpa时保持2h，采用常压灭菌时，要求3h内温度升至 100℃，保持10h后停火焖3h，温度降至60℃后出炉，自然冷却。

　　2.2  接种和培养

　　待料温降至25℃以下，按无菌操作规范接种，一般每箱2～3瓶原种，可接64袋。接种后的栽培袋移入培养室培养，培养室温度一般为25℃左右（走菌初期温度控制在20℃左右，待走菌一段时间后，可将温度调高并控制在25℃左右），空气相对湿度60～70%。要求暗光培养，适当通风换气，约25～35d菌丝便可长满栽培袋或栽培袋料面长出原基。

　　3  出芝管理

　　当菌丝长满栽培袋或栽培袋料面长出原基时，移入栽培室出芝。拔掉棉花塞，将套环下压至料面，竖直摆放在培养架上，袋与袋之间留3cm左右。出芝期只给水，不使用任何添加剂，不使用农药，病虫害完全采取综合防治，以环境的预处理和卫生维护为主[8]。出芝期间，要保持适宜的温度、湿度、光照和通风量，以利于原基的形成与分化和子实体生长，需做如下控制。

　　3.1  温度控制

　　温度要保持在25～28℃。若低于20℃，则原基会变黄、僵化，不能正常分化；25℃左右子实体生长较慢，质地较密，皮壳层发育较好，有光泽；30℃子实体发育快，个体发育周期短，质地不很紧密而且盖薄，色泽也较差[7]。

　　3.2  湿度控制

　　要求有较高的空气相对湿度，一般为80～90%。湿度低，子实体不易形成，形成的子实体生长也慢，甚至会僵化。可向地板洒水或向空间喷雾状水，尽量保持湿度在85%左右。

　　3.3  光照

　　需要给以一定的散射光，全黑暗条件下不会形成子实体。需要的光照度为200 lx左右，相当于日光灯下的光照，光线要均匀，不要改变光照的方向，因为灵芝有趋光性，改变光照的方向，菌盖会畸形。

　　3.4  通风换气

　　应适当通风换气，以利菌盖正常展开。二氧化碳浓度过高时，将抑制菌盖展开，常出现鹿角状的畸形芝[7]。可通过开门窗来调节室内空气。

　　4  采收

　　在适宜的栽培条件下，通常灵芝从原基形成到子实体成熟需25～30d时间，但子实体成熟后还需继续培养7～10d，使子实体更坚厚，并让其充分散发孢子粉[9]。

　　子实体生长初期为白色，后变为浅黄色，然后渐变为褐色。当菌盖边缘的白边变为褐色时即可采收[10]。采收时，可用果树修剪刀在位于套环上方剪下灵芝，按商品要求剪去过长的菌柄，盖面朝上，菌柄朝下，及时晒干或烘干（温度不超过60℃），否则腹面菌孔会变成黑色，降低品质。

　　若管理得当，7～10d后可从刀口处重新出芝。如要收集孢子粉，可采用套纸套的办法收集孢子。（来源：食用菌教学网）