（2）高压灭菌：装瓶后立即置灭菌灶进行灭菌，常压灭菌应在100℃保持10～12小时，或高压灭菌在1.47×105Pa下保持1.5小时以上。灭菌后瓶内米饭应上下干湿一致，趁热将瓶立即运入接种室自然降温至30℃以下备用。

    （3）接种及发菌：接种室要求干燥、清洁。接种时将装有培养基的罐头瓶放入接种箱或超净工作台中严格消毒、规范操作，以降低污染率。将接种好的培养基放入培养室的层状培轳养架上，在清洁黑暗条件下发菌培养。培养室的空气湿度保持在60～65%，室温为18℃左右，不须通风。接种之后的前3天要求每天摇瓶一次，以使培养料表面尽快布满菌丝，一般经过15～20天的培养，菌丝可吃透培养料，进入子实体分化期。

    （4）子实体原基形成阶段的管理在人工培植过程中，子实体原基的形成是栽培成功的关键，良好的外界刺激如光照、干湿度、温度等有利于子实体的分化、生长。

    ①加大温差刺激北冬虫夏草真菌菌落生长温度为0～30℃，最适温度20～25℃，菌丝体在6℃以上、30℃以下均能生长。形成子实体的最佳温度为10～20℃。子实体原基形成过程中，只有在保证温差刺激的强度与周期时才会出草快、均匀。温差刺激范围人工培植冬虫夏草，子实体原基的分化和生长适温为10～25℃，最低不低于5℃，最高不高于28℃，温差刺激的范围在20～10℃，即在20℃时向下降温幅度至10℃。温差刺激强度温差刺激时间上，一般要求每天低温刺激在l0小时左右，最低不少于6小时。温差刺激的周期温差刺激的周期要在10～15天，若周期不够长，则气生菌丝生长旺盛，子实体分化不好、畸形多。

    ②增强光照刺激在子实体形成阶段，要求每天光照12小时以上，光线强度在200lx以上，如光线太弱或没有光照，即使有足够的温差刺激，也会使子实体原基形成受阻，气生菌丝旺长。

    ③保证空气湿度，加强通风透气在子实体形成阶段，每天要求换气3次、每次15分钟，从而降低室内C02的浓度，抑制菌丝旺长。空气湿度应保持在70%左右。若湿度过大，气生菌丝生长旺盛，子实体原基分化受阻，出草受到极大限制；若湿度过低，水分供应跟不上，菌丝体向子实体转化也会受阻。

    （5）子实体原基生长阶段的管理从子实体原基形成到子实体成熟需20～30天，在这期间，不再需要进行大的温差刺激，一般温度应控制在18～25℃，应加大湿度和通风换气工作，一般现蕾时空气湿度达到80%左右，子实体长到lcm时增大到90～95%。随着子实体的生长，瓶内需要空气，但又要减少水分散失，一般采取不去掉封口膜，而将挑针用75%酒精消毒后在封口膜上刺若干个小洞的方法来保证空气交换和流通。

    （6）成熟与采收当子实体长成上粗下细的棒状，且表面出现粒状粉末时，表明子实体成熟，即可采收。采收时用带弯头的小铁铲，从子实体根部轻轻铲起，不要伤及子实体。采收后应及时分级烘干，在干燥箱中于40～60℃温度下经过2小时即可烘干。烘干后稍回潮使之不至于憔悴，用线扎成小捆放人塑料袋密封保存。