菌种保藏之-滤纸保藏法
发布时间:2013-11-04
来源:中国食用菌商务网
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏。前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14~17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便,不需要特殊设备。 将滤纸剪成0.5cm3 1.2cm的小条,装入0.6cm3 8cm的安瓿管中,每管1~2张,塞以棉塞,121℃ 灭菌30min。将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,充分生长。
取灭菌脱脂牛乳(脱脂牛乳的处理:牛乳2000r/min离心10min脱脂,然后115℃ 灭菌20min,或间歇灭菌3次,经检查无菌后备用)1~2mL滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。
用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。将安瓿管放入内有P2O5作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干。 将棉花塞入管内,用火熔封,保存于低温下。需要使用菌种,复活培养时,可将安瓿管口在火焰上烧热,滴一滴冷水在烧热的部位,使玻璃破裂,再用镊子敲掉口端的玻璃,待安瓿管开启后,取出滤纸,放入液体培养基内,置温箱中培养。
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