食用菌固体菌种液化技术

　　闻新发　闰晓笛

　　文章编号1（X）0-8357（2006）06-（X）20-01

　　食用菌的不同品种，采用液体培养液扩制菌种，只需4－7d;用固体培养基扩制固体菌种，少则20d左右，多则40d以上。而在菌种提纯、复壮、驯化、出菇实验菌种保藏与运输等方面，固体菌种亦有不可替代的优势。利用固体菌种直接扩制液体菌种，不仅具有菌丝纯、发菌快、周期短等效果；而且具有操作简便、安全可靠、易于推广等作用。

　　本文介绍的固体菌种液化方法，不仅可以用于液体栽培种的快速扩制，而且可以用少量固体菌种的快速繁育，现介绍如下，供读者参考。

　　1 消毒与备种　把选用的固体菌种、酒精、棉球、酒精灯、镊子、接种勾、备用菌种空瓶或茶缸等用品，放入预先消毒的接种箱中。操作者进人接种状态，然后接种箱进行气雾消毒30min。备用空瓶用酒精内外擦一遍，接种勾和备用瓶口均在酒精灯上“过火”备用。固体菌种瓶（或袋）口用酒精浸透消毒，开口后再用酒精棉球从内到外擦一遍。用接种勾扒去老菌种和表面菌皮。消除菌种表面杂物后，再用酒精棉球由内到外擦一遍。用接种勾轻轻扒碎菌种块，拨人备用瓶中（扒出的菌种数量多少以覆盖液体培养基表面为适宜），棉塞过火，盖住备用菌种瓶口。

　　2 培养菌丝　备好的固体菌种瓶，放人25℃恒温培养箱中培养2一3d，促使备用菌种萌发新菌丝。

　　如果小容量培养，可以采用电热毯、自动恒温控制器、10A接触器、养鱼用的增氧机和玻璃瓶或5掩容量的食用油塑料瓶，在接种箱中培养菌丝。其中，供给的氧气仍然需要严格过滤后再输人到液体培养液内。

　　3 液体培养　以平菇、香菇、白灵菇、鸡腿菇的通用液体培养为例：按培养容器可以装人的液体总量，配人2.5%玉米面，1%面粉，05%脱脂大豆粉，1%白糖。0.5%多维葡萄糖，0.1%磷酸二氢钾，0.1%色拉油或0.03%泡敌（聚氧丙烯甘油），合成液体培养液，pH6.5一7。蒸汽灭菌，降温26℃左右，无菌操作加人备用菌种，恒温25℃增氧液化。

　　小容量液菌扩制，可以先将液体培养液煮沸02而n，盛人铝壶中（不加盖），与玻璃瓶或5掩容量的食用油塑料瓶（不加盖），同时放人接种箱中，趁热点燃气雾消毒剂，封闭降温后加人瓶中，接入菌种，盖严增氧瓶塞，通气液体。

　　二次液体菌种扩制，可以采用20吨容量的大油桶等容器，配液后直接用蒸汽加温灭菌，封闭降温，无菌接种8一10kg液体菌种（或1一Zkg固体菌种），均匀排人4一6根增氧管，外包电热毯和保温材料，恒温25℃培养4一7d。其中，固体菌种培养菌丝后，加人液体培养液，培养24h产生菌球。把固体菌种直接加人液体培养液，培养2一3d产生菌球。

　　4 注意事项

　　4.1 上述方法，适用于栽培种扩制，或液体菌种拌料压块或直播出菇。如果用于栽培袋注射点种，应在固体菌种加人时或在液化菌种使用前加人过滤条件，隔离固体菌渣。

　　4.2 固体菌种要选用适龄、不含杂菌的优良菌种，以瓶或培养料表面点种的菌种为最佳，不宜使用袋装固体菌种。尤其是培养料中心打孔点种培养的固体菌种，由于菌种是从内向外生长，不利于菌种提纯，不宜用作液体菌种。

　　4.3 固体菌种液化全程，必须做到“无菌操作”和“无菌运行”，才能生产出优良的液体菌种。