培养皿使用规格为90毫米或110毫米的。也可用规格为25毫米×200毫米的大型试管，但操作不太方便。
    先按常规制备母种培养基，装入三角瓶，棉塞封口，加皮纸包封；同时将培养皿洗净后用牛皮纸包好。二者同时进行灭菌处理。121℃下灭菌30分钟，待灭菌锅内压力为零时，取出灭菌物，放入事先消毒的接种箱。打开牛皮纸包封，一手持培养皿，一手持三角瓶，利用手指调控使培养皿上盖开启约1～2厘米倒入培养基液体约10～20毫升，盖严。将培养皿平置，冷却后成一光滑平面，俗称平板 。平板冷却至30℃以下时，接入待脱毒菌种。
    接种方法：挑取米粒大小的一块种源，接入平板边缘。接种后置于规定温度下培养〔视品种调控温度）。当菌丝萌发至最长为2厘米时，用尖刃接种工具切取菌丝尖端1毫米左右，接入新制平板上。此为1次脱毒。一般可重复操作3～4次。次数越多，脱毒效果就越好。