食用菌孢子分离分为单孢分离法和多孢子分离法两种,育种常用的是多孢子分离法,而单孢子分离用于杂交育种。多孢子分离是利用食用菌有性繁殖进行的,孢子分离后,菌丝萌发,是担子菌生活史的一部分,担孢子局域保持亲本遗传性状的特点,但是遗传性能不稳定,容易发生突变,多孢子分离能够选育出比偶亲本更加优秀的品种。
1、制备培养基
常规法制备培养基,待用。
2、取孢子
用弹射法取得孢子,“种菇”要选择去八九分成熟的,这是弹射的孢子数量多、活性强。“种菇”表面消毒同本站食用菌育种之组织分离中的消毒事项。
3、稀释
在无菌状态下,用无菌水稀释孢子,制成孢子悬浮液。
4、涂布
取孢子悬浮液1-2滴在培养基表面,并用接种环涂布。
5、培养
定期观察孢子萌发情况,有染菌的及时挑出,挑选萌发早,萌发后长势好的菌丝进行转管。
多孢子分离比组织分离更加容易染菌,成功率较低,因此要做很多个重复才能成功。多孢子分离出现变异的可能性更大,必须做出菇实验,鉴定性能正常才可以使用。