1、酒精灯火焰要高: 酒精灯火焰不够高时,火焰周围的无菌范围小,不利于无菌操作,也易造成接种钩灼烧灭菌不彻底,影响接种后的成品率。影响酒精灯火焰大小的因素,一是酒精浓度,二是灯芯。酒精浓度越高燃烧越好,最好使用95%的工业酒精。灯芯材料太实,塞得有紧时,内吸的酒精少,火力也不旺。所以,灯芯最好用棉花捻制,并拔出一定的长度。
2、母种试管表面和管口要灭菌彻底: 作为接种物的母种试管表面并未处于无菌环境下保存。因此,接种时要注意试管表面和管口的灭菌。具体方法:拔下棉塞后,在酒精灯火焰上转动2-3圈,这样可有效地减少菌种造成的污染。
3、拔塞、取种、接种及棉塞必须在火焰上方或附近:操作母种试管和待接种的试管一旦打开棉塞,就不能离开火焰,应为只有在火焰周围很小范围内才能是绝对无菌的。
4、接种钩:接种钩要灼烧彻底,接种钩最好用较薄的材料制成,灼烧时烧至红色。并注意接种钩灼烧的长度,灼烧长度以试管长度为度,在火焰上方反复灼烧3-4次即可。
5、接种时掉到地上的棉塞不能使用:接种时棉塞要夹于右手指间,不可放在操作台上。一旦掉到台面上,塞之前要在火焰上过一遍再用。掉到地上的棉塞严禁使用。
6、接种钩火焰灭菌后要冷却:不经过冷却的接种狗狗会烫死菌种。冷却一般在无菌的待接种的试管上部空间进行,也可在斜面上端冷却。
7、消毒酒精要清洁:注意定期更换。
8、操作要到位:动作轻盈、敏捷、快速、准确,尽可能地减小声音。
9、接种操作后的工作:及时清理,打开门窗,排除接种时酒精燃烧放出的废气。之后关好门窗,打开紫外线灯进行使用后的消毒,以便以后使用。