将母种在无杂菌的区域内转接成原种，原种制好后，当菌丝长到原种瓶一半时，将原种瓶在接种箱或接种室，或在无杂菌的区域内，弃掉封口的棉塞或牛皮纸，用两层塑料薄膜扎紧，使其缺氧。当菌丝生长耗尽瓶内的剩余氧气后，便停止生长或生长极为缓慢，即使菌丝长到瓶底，但因缺氧不能呼吸也就不可能转向生殖生长阶段，这样就可以达到保藏菌丝始终充满生命力而不衰老的目的。不过，在使用之前，一定要将瓶口的封头松动(但不能打开瓶口)，让其呼吸一至两天氧气，使菌丝具有旺盛的生命力方可使用。

    此方法实用简单，特别适宜刚开始种菇的菇农，以及没有贮藏菌种设备的菇农采用。只要注意无杂菌操作，便会给菇农在制菌种时带来极大的好处。