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食用菌制种炉火干热接种法的操作要领

发布日期: 2018-12-06   来源:中国食用菌商务网

    经过科研人员在生产一线多年实践经验,证实了利用燃烧着的蜂窝煤炉上方干热区,形成的干热无菌区间内接种食用菌母种、原种、栽培种的方法简便易行,简单可靠,工作效率快。只要掌握好操作要领,其成功率可达到98%以上,现将具体操作简述如下。
(一) 材料及用具
  蜂窝煤炉一个,工作台(与炉同高),坐椅,空周转箱,支架,接种针、铲、镊子,专用接种器,刀片,绳子,护筒(用铁皮做成长20cm直径与原种瓶外径相当),0.1%升汞棉球,75%酒精棉球。
(二) 操作要点
 在无菌接种室煤炉生火后,微启风门,这样就形成了一个干热气流即干热无菌区域。
 ①母种分离 将巳灭菌的琼脂斜面试管、谷类试管等,将其4~5支用绳子绑成一组,放支架上试管口正对干热区。用右手食拇指拨下管口棉塞(不能弃掉),在无菌区内用酒精棉球将试管棉塞外表消毒,然后左手将消过毒的刀递给右手的大拇指与食指拿好,左手将要分离的巳经用升汞消过毒的食用菌子实体,放入右手的三指和四指间夹住,左手进行子实体再次消毒,再放回左手;用刀片切开子实体,取柄部中心0.5cm见方的组织,再用无菌接种针挑起,经过干热无菌区伸入试管培养基面上,再塞好棉塞即可。就依照同样方法依次接完一组,再进行第二组、第三组分离接种。
 ②转接母种和原种制备 将已用升汞棉球外壁灭菌的试管母种,放支架上管口伸入干热无菌区,拔去棉塞。再用无菌接种铲取试管内母种一小块,经过干热无菌区,伸进另一支已灭过菌的母种培养基面上,达到转管转接母种的目的。母种转接原种的方法是一致的,不必重复说明。
 ③栽培种制备 用支架将护筒固定在干热无菌区上方横卧,将要被接种的已灭菌的栽培种瓶伸入护筒内,瓶口伸入干热区内,再用无菌专用接种器取原种瓶内原种,经过干热无菌区伸入被接栽培种培养基瓶挤出,然后盖上棉塞,这样—瓶栽培种就转接好了。依照此法完成所有栽培种转接工作。
 (三) 注意事项
 ①母种、原种、栽培种、被分离子实体都分别要消毒灭菌处理;
 ②接种室、工具、辅助材料都要统—消毒灭菌;
 ③整个操作始终不得离开炉火干热区接种;
 ④炉子风门微启,如果太热了可以短暂关闭;
 ⑤各级种剩装容器必须为玻璃器件;
 ⑥接种室要设无菌缓冲间和空气对流无菌缓冲窗。
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