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    金针菇多孢分离育种方法

    发布时间:2015-12-15

      来源:中国食用菌商务网

        金针菇的孢子分离法分单孢分离与多孢分离两种方法,驯化育种采用的是多孢子分离法,该法又分为“种菇”孢子弹射法和菌褶贴管壁法两种。
        1、孢子弹射法
        取“种菇”切去菌柄,表面用70%的酒精擦洗干净或浸入0.1%的升汞水中1~2min,无菌水冲洗数遍后,用滤纸吸干表面水分。在接种箱或无菌室内按无菌操作规程将“种菇”的菌褶朝下,用铁丝支撑置于培养皿上,放在消毒擦洗过和大型钟罩下,把灭菌过的滤纸置于培养皿容器内。整个装置要让之通气,否则罩内湿度过大,孢子反而不易落下。经过12~20小时,就可以看到在培养皿内或滤纸上散落一层白色的孢子印。用无菌接种环沾取少量的孢子,置于盛有无菌生理盐水的大试管或三角烧瓶中稀释,制成孢子悬浮液,再用无菌的注射针筒或滴管,吸取孢子悬浮液,注入1~2滴孢子液于培养基表面,并用无菌接种环涂布培养,待孢子萌发后挑取孢子萌发早、长势好的菌落进行转管培养。
        2、菌褶贴管壁法
        钩取一块干净、发育良好的金针菇菌褶,在无菌操作条件下,贴在斜面培养基上方的试管内壁上,为了让之贴牢,可加1~2滴无菌水在试管壁上。放好菌褶后,塞入棉塞,置于适温条件下培养。待看到培养基上产生与菌褶相应大小的雾状物时,立即将附在试管壁上的菌褶片在无菌条件下取出。待长成肉眼可见的菌丝时,挑取并放入新的试管培养基中进行培养。
        孢子分离污染率较高,要剔除肉眼可见的各种杂菌。之后,挑取的各菌株一定要经过出菇试验来鉴定是否是优良的驯化菌株。

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