栽培前 1～2 个月大棚周边清除杂草，栽培大棚内应采用人工或机械除草。在除草后、耕地前棚内及周边应撒适量生石灰，通常施用量为 50～100kg·667m－2 。生石灰起到调节土壤 pH 的作用，对土壤中的杂菌和虫害有杀灭作用。撒石灰后进行旋耕，土地翻耕深20cm，土块粒径 3cm 左右，以土壤不结块为宜。平整土地，按宽 0. 6 ～ 0. 8m 作畦，畦面高 10cm，畦间距30cm 作沟。畦间开沟的目的是便于管理、采收时人员行走，以及起到排水作用，避免畦面积水。此外，场地四周也可撒生石灰对病虫害起到防治作用。

 

羊肚菌属于低温品种，自然条件下，羊肚菌栽培季节应选在秋冬季，自然气温下降到 18～25℃，地温20℃以下，比如，江苏连云港地区适宜播种时间选在11—12 月。播种时挑选质量合格的菌种，剥去菌种袋。双手、播种工具、塑料盆等表面消毒后，用手捏碎或用菌袋粉碎机粉碎至直径 1～1. 5cm 大小的菌种块放于塑料盆或编织袋中，运送至大田准备播种。播种方式可采用撒播或沟播，撒播时将菌种揉散或用菌袋分离机打散，均匀撒于畦面，用钉耙或旋耕机在畦面上旋耕10cm，使菌种和土壤混合; 沟播时于栽培畦面上每间隔 20～30cm 挖沟，沟深 5～10cm，将菌种均匀撒入沟中，后用畦面上的土回填沟内，土壤覆盖菌种厚度约3cm。
 

播种后，立即在畦面覆黑色地膜，地膜厚 0. 004～0. 015mm，宽度与畦面一致或略宽，膜上每间隔20cm 打孔透气。羊肚菌生产中通常使用黑色地膜，能起到加快积温、保湿、防涝、促进菌种萌发、抑制无性孢子过度生长及抑制杂草生长的作用。