在制作琼脂母种培养基的时候,在灭菌冷却后的母种培养基上往往有很多冷凝水,会影响菌种的生长吗?答案是肯定的,特别是在接种金针菇、蟹味菇、虫草等菌种时,如果母种培养基带有比较多的冷凝水,那么以上这几个品种的菌丝生长都不会太好看。那么怎么可以避免这种情况?如何才能做得更好?
1. 培养基灭菌计时结束,压力表指针回零后,可将高压锅锅盖打开,但不拿走,在锅上移开一道缝隙,让锅内的热气涌出,让棉塞和试管内的水蒸气先蒸发一部分,约10分钟后,再将母种培养基取出,这对预防冷凝水的形成有很大的作用;
2. 母种培养基灭菌完毕,取出摆放斜面后,可用多层厚厚的干净纱布等将刚摆好的试管培养基盖好,一是可以防止在冷却过程中,有灰尘降落在试管培养基表面,影响以后的无菌操作;二是可以防止在冷却过程中,玻璃试管内外温差过大,尽量降低冷凝水的形成。实际这个方法还不能完全杜绝冷凝水的形成;
3. 如果使用硅胶塞封试管口,可提前一周将母种培养基做好,如果用棉塞封口,时间可以适当缩短,这样经过一周左右的静置,母种培养基管壁和斜面上的冷凝水可以基本蒸发掉,在使用时就会非常方便。这一点可能有很多人反对,因为很多书上说,母种培养基要现做现用,或尽快使用,否则容易被杂菌污染,小编认为没有那么严重,只要母种培养基灭菌彻底,放置时间再长也没有什么问题,这一点大可放心。不过在放置时要注意环境卫生,培养基试管口要稍微抬起放置,不能放在灰尘很多的地方,试管口可以用牛皮纸包好,特别是棉塞封口的培养基不能密封保存,防止棉塞滋生杂菌,这一点很重要。
4. 如果实在要急用培养基,带冷凝水接种也可以,有可能在菌丝生长时,会受到冷凝水的影响,生长暂时可能表现不良,不过没有问题,随着水份的蒸发和菌丝的快速生长,慢慢就会表现正常。这里提几个细节,如果带水接种,在母种培养阶段,母种培养基的口部要稍微抬起,防止冷凝水流到管口,打湿棉塞或硅胶塞,这个会对菌种的质量产生不良影响;如果冷凝水太多,可在接种时倒掉,这时要注意无菌操作,不能让冷凝水回流,倒完后,继续保持倾斜姿势,在酒精灯火焰附近将管口灼烧后,才能开始接种操作,严防管口带菌,随水回流进入管内,造成不必要的污染;也可将管口先灼烧灭菌后,再将水倒掉。