从衰退的群体中寻找尚未衰退的个体,进行分离培养,达到恢复菌种优良性状的过程,称为菌种复壮。在实际生产中,一般在菌种尚未退化之前进行菌种复壮。
1. 菌种复壮的原理:自然界生物以遗传变异为基础通过自然选择得以进化。变异提供了选择的基础,选择保存适应环境的个体,这些个体使优良特性得以遗传。如此再变异、再选择、再遗传,循环往复,使生物得以不断进化。
2. 菌种复壮方法:
(1)菌丝尖端分离:挑取健壮菌丝体的顶端部分,进行纯化培养,使菌种恢复原有的生活力和优良种性,达到复壮的目的。
(2)适当更换培养基:长期使用同一培养基继代培养菌种,可能会使菌种生活力逐渐下降。在菌种继代培养中,要经常改变培养基成分,在培养基中适当添加酵母膏、维生素等物质,以刺激菌丝生长,提高菌种活力。
(3)进行分离复壮:从栽培的群体中,找出尚未衰退表现的个体,通过组织分离获得菌种,进行提纯复壮。采用菌丝体进行菌种复壮时,用无菌水将斜面上的菌丝稀释,再将菌丝体放入装有无菌蒸馏水的三角瓶中摇匀,然后转接到平板培养基上,使菌丝分布均匀,适宜条件培养至萌发成菌落。从中挑选生长健壮的菌丝转接后作为母种。需要进行栽培试验,如果复壮菌种与原来菌种性状一致,表明菌种得到复壮。
(4)定期进行菌种分离:对生产中应用的菌种,每1~2年分离1次,才能起到复壮的作用。通常选择具本品种典型性状、生长健壮、无病虫害的子实体进行组织分离,重新获得生长旺盛、活力强的菌丝。反复进行无性繁殖,也会造成菌种衰退。可定期采集有性孢子通过单孢杂交或多孢杂交进行菌种复壮。不管采用何种方法,得到的菌种只有经过出菇检验证明其性状优良后,才能在生产上应用。