香菇的母种繁育,大家了解吗?我们知道用香菇的组织、孢子或菇木的菌丝经分离、纯化和转管培养出来,再用于繁殖原种或保存用的菌种,称为母种。但具体如何繁育,有以下的几点。
一、菌种分离
1、组织分离
要培养出优良的菌种,必须要有好的母种,好的母种又是来源于健壮的香菇个体,因此,首先必须选择发育正常、个体健壮、没有虫咬的新鲜菇蕾作为分离的材料。菇蕾采回后,不需用水洗,也不需用药水消毒,放入干净的培养皿内,用消毒过的手或解剖刀,将香菇从中剖开,在盖与柄接触的部分切取黄豆大小的菌肉,放在已准备好的培养基上,塞上棉花即可。
2、孢子分离
选择个体强壮,八分成熟的香菇,除去菌柄,菌褶朝下挂在玻璃漏斗上一条特制的铁丝钩上,漏斗盖住培养皿(培养皿放在一只垫有纱布的搪瓷盆中),静放12-20小时,菌褶上的孢子(种子)便大部分落在培养皿内,形成一层白色粉末状物,即可作为分离培养使用。
孢子接种时,用接种针取出少量孢子,用无菌水配制成孢子悬浮液。再用接种针,取出少量悬浮液,用划线的方法接种于培养皿内的培养基上,待孢子萌发,生成菌落后,选择孢子最先萌发并生长最好的菌落进行纯化转管繁殖。
3、菇木菌丝分离
选取未出过菇或刚出过菇不久、但已恢复菌丝生长的菇木(肉眼看不见杂菌)一小段,拿回室内,不需表面消毒,用皮带冲在要分离的部分,将树皮取掉,然后用酒精消毒皮带冲,冲口在酒精灯火焰上灭菌,灭菌后,即时打入菇木已取皮的部分,迅速取出皮带冲,用灭过菌的小剪刀在冲口菇木块中间,剪下黄豆粒大小的一块,接入培养基上即可。
以上三种分离法,整个过程均应在无菌室内进行,一切用具均应经过严格消毒,以防杂菌污染。无菌室事前要用5%的石炭酸喷射,有条件的再经过紫外线灯照射20-30分钟。在接种台上,最好铺上一块用2%的来苏尔消毒过的湿纱布。
二、培养
菌种分离接种后,放在25℃左右条件下培养,两三天即可看见白色棉花状的菌丝从菇肉或木块上长出,三、四天便可看见从孢子萌发出的白色菌丝,十多天整个试管便长满菌丝。在培养过程中如发现试管中的培养基上有青的、绿的、黄的或糊状物出现时,说明此曾已被杂菌污染,不能应用。因此,在分离菌种时通常应分几管,以选择生长最优良者,进行纯化或作为母种转管繁殖。
以上三种分离法,常用的是组织分离法,因无性繁殖变异较小,操作容易,又不易带进杂菌。在没有香菇的情况下,可用菇木菌丝分离法。如要用杂交法育种,则必须用孢子分离法,而且要挑取单个的孢子进行杂交。
三、纯化
组织分离不易带入杂菌,但孢子分离时往往带入杂菌,因此必须进行纯化。即在培养基上挑取香菇的菌丝,放入新的培养基上,连续几次,便可得到纯的香菇菌丝种。这一过程,称为纯化。
四、母种的转管繁育
将一条试管的母种,分接于许多条试管内繁殖,称为转管繁育。一管母种,可转30管左右。接种体大,菌丝生长快;接种体小,则菌丝生长慢。作法,用经过消毒的接种钩,把母种连同培养基钩一小块,约0.5 平方厘米,放入母种培养基的中间,以利菌丝迅速繁殖。
整个过程也要进行无菌操作。培养温度在25℃左右,接种后一天,便可见从接种体上长出白色的菌丝,十多天菌丝长满全管,便可用来接入原种培养基内或作为母种保存。
五、母种保藏
保存菌种最好用马铃薯、葡萄糖或白糖培养基,不宜用木汁琼脂培养基,因后者菌丝生长快,易老化。在常温下母种可以保存2-3个月(如时间过长,培养基因水分蒸发而干缩,菌种老化),如果继续需要,必须及时转管保存。在梅雨季节和高温多湿的夏天,要特别注意杂菌污染。
在低温下,培养基水分蒸发慢,同时菌丝新陈代谢慢或停止,菌种保存的时间可以长些。在1-4℃的冰箱内,菌种可保存半年左右,但必须注意勿使棉塞潮湿而长杂菌。保存温度不能太低,否则斜面培养基要结冰脱水,菌种特性易衰退或死亡。
放在低温长时间保存的母种,使用前,必须先将菌种放于适温下,让其苏醒后再即时使用(久放菌种易衰退),否则转管不易成活。为防止菌种因多次转管而发生退化或变异,在2-3年内应重新分离保存。(来源:云中阿月)