菌种生产在YPH9红平菇栽培过程中是重要的准备性工作,原种制作是菌种生产的重要步骤。
(1)配方:小麦粒98%,白糖和石膏粉各1%。
(2)配制方法:将麦粒称量后,用清水淘洗干净,置清水中浸泡10~15小时,滤水后放入沸水中煮沸25~30分钟(无白心),滤水后与白糖和石膏粉混拌均匀,冷却 后装入750毫升菌种瓶内,麦粒装至瓶肩,用棉塞堵封瓶口。也可将麦粒装入500毫升生理盐水瓶内,装至500毫升刻度线,用棉塞堵封瓶口。装完后放入高压灭菌锅内,在1.4千克/厘米2蒸汽压力下保持2~3小时离火,当压力表指针自然回到“0”位时,打开锅盖,待热蒸汽散尽,锅内温度降至40℃以下时将料瓶取出。
(3)接种培养:接种在接种箱内进行,操作者依次将上述培养好的YPH9红平菇一级母种斜面菌丝试管、麦粒料瓶(二级原种培养基)、酒精灯、消毒杯、甲醛、高锰酸钾或气雾消毒剂、酒精棉球、接种锄、接种铲、火柴放入接种箱内,按转接母种的操作方法对接种箱进行密闭消毒灭菌。母种试管口消毒灭菌在酒精灯焰上方3~5厘米处的火焰无菌区内停留,接种锄过火灼烧伸入母种试管5厘米冷却10秒钟,再伸入管底在母种菌丝斜面上从管底自下而上间距1厘米作横切划痕,钩除上端1厘米的菌丝斜面和管壁的气生菌丝,再取接种铲在酒精灯焰上烧烤后伸入母种试管5厘米处冷却10秒钟,用接种铲口在母种菌丝斜面上自上而下从中作一条直线的纵切划痕,把已作横切划痕的菌丝斜面一分为二成两块。
接种铲垂悬于母种试管内。右手取下麦粒料瓶棉塞,置左手掌心,用拇指按压,右手再取接种铲,分3次从母种试管内挑取3块菌丝块接植于原料培养基的麦粒粒面,将3块菌丝块分布均匀形成三点式,接种铲试管内垂悬,右手取左手掌的棉塞在酒精灯焰上过火后堵封瓶口,依次进行转接。接毕,置20~28℃洁净环境遮光培养,一般10~15天菌丝可长满瓶,即可用于转接栽培种。