灵芝母种制备常采用组织分离法获得纯正的母种。选取尚未木栓质化的幼嫩组织，在无菌条件下，取灵芝组织块放在0.1%汞溶液内进行表面灭菌，处理2分钟，再用无菌水冲洗，用无菌纱布擦干。用解剖刀削去子实体的外部皮壳，将菌肉切成小块，接种在斜面培养基中，放在黑暗条件下，经10天菌丝可长满试管，即为纯正的母种。可用以扩大培养转接原种。春栽5月中下旬栽培接种，4月中下旬制原种；秋栽8月栽培接种，7月制原种。椴木接种一般在春季4月进行。

    适合灵芝栽培的培养基种类很多，仅介绍最常用的几种。

    （1）杂木屑77%，麸皮18%，玉米粉3%，蔗糖1%，石膏粉1%。

    （2）甘蔗渣50%，杂木屑48%，黄豆粉1%，石膏粉1%。

    （3）棉籽壳44%，杂木屑44%，获皮5%，玉米粉5%，蔗糖1%，石膏粉1%。

    （4）玉米芯45%，杂木屑45%，麸皮8%，黄豆粉1%，石膏粉1%。

    3.栽培方法

    （1）瓶栽用750g、口径4cm的瓶，也可采用广口瓶或罐头瓶。

    ①拌料装瓶

    主料与辅料等先拌匀，把糖溶于水中而后逐渐加入料中并充分拌匀，每100kg干料加水140 ~ 160kg，以手紧握料指缝中有少量水滴下为宜。采用徒手或装瓶机分装，要求松紧适中，直至离瓶口lcm处，压平，中央用捣木打孔至瓶底，洗净瓶口、瓶壁污物，瓶口用牛皮纸包好。

    ②灭菌接种

    常压100℃灭菌，持续8~12小时，高压灭菌121℃，保持1.5小时。待冷却后，在无菌条件下接入菌种。然后放到培养室，控制温度25℃，室内相对湿度控制在70%以下。培养室内保持黑暗状态，以利菌丝生长。一般经20天发菌培养，当菌丝长至1/2瓶时，可以除去封口纸，搬至子实体发生室。此时控温25~28℃，相对湿度增至90%~ 95%，保持空气清新，增强漫射光。菌盖不断生长，直至四周白色生长圈消失，即停止生长扩大，但仍可继续加厚。子实体形成菌管，弹射出红褐色孢子。

    （2）袋栽与瓶栽过程相似，只是采用聚乙烯或聚氯乙烯塑料袋，装至离袋口约10cm处，收拢袋口，套塑料套环，加棉塞。灭菌，在无菌条件下接种培养。当菌丝长到袋的1/2左右时，拔去棉塞和套环，露出料面，让其出芝。注意不要过早打开袋口，以免菌丝干涸而影响子实体发生。

    （3）段木栽培选择栎树、榆树、桦木等阔叶树种，树龄7~10年，树径6 ~ 15cm。

    ①砍伐截段

    伐树在落叶后至翌年萌芽前进行，砍伐时不要损伤树皮。接种前锯成段，浸水12 ~ 15小时，增加含水量，以利发菌。

    ②打孔接种

    用皮带冲安装在接种锤上打孔，直径约9.6~10mm，随即用接种枪接入菌种，然后用树皮盖封穴，接种选晴天进行，做到边打孔，边接种，边封穴。

    ③发菌

    以“井"字形堆叠，高约1m，底部用石块或废木垫空，要求堆内温度控制在20℃以上、28℃以下，晴天中午气温高时应撑膜通风降温。每周将段木上下、内外翻动1次，促进发菌均匀。约经30天，接种穴和树皮下长满菌丝，发菌结束。

    ④埋土养菌及子实体发生

    选排水良好、有水源或树荫下作菌床，畦床宽1.2m，深20cm。将段木横向排放在菌床内，段木间距5cm，以无杂质的细壤土填没段木间隙，而后上面覆2cm的土层。搭荫棚离床高60cm，棚上盖稀草帘，外覆薄膜，防止直射光和大雨冲刷。这段时间减少水分供给，养菌约30天。当段木两端断面上具有黄白色菌丝即进入子实体发生阶段，增加空间的湿度，晴天喷水1 ~2次，保持土壤湿润。7月初子实体陆续发生。第二年5~7月盛产，第三年仍有子实体产生。

    4、采收加工

    当菌盖四周白色生长圈消失，整个菌盖呈红褐色，出现咖啡色粉末状孢子时，即可摘下子实体。一般从接种至采收约需50~60天，采后置竹帘上晒干，也可低温烘干。若要收孢子粉可以采用套袋法或架子闭封法收集，然后再摘取子实体。