1、母种培养：是指用组织分离或孢子分离得到的菌种。母种培养基的制备通常用土豆洋菜培养基。配制1000毫升培养基，用土豆200克、琼脂18-20克、葡萄糖20克。

 

做法：先将土豆洗净去皮，切成蚕豆粒小块，放入1000毫升水中煮沸30分钟，用6-8层纱布过滤，补足损失水分。将琼脂加入溶化后，加进溶解的糖，补充水分至1000毫升。以后分装试管，每管装量1/5-1/4，并加棉塞、包纸。在1.2公斤压力下灭菌30分钟，趁热摆成斜面。冷却后置于25℃-27℃条件下观察无杂菌即可接种。一支母种可转管25-30支。

 

无菌操作下接种的试管置于25℃左右恒温条件下培养，半个月左右菌丝可长满试管。培养过程中应注意除掉杂菌污染的试管。培养好的母种移入冰箱，在4℃条件下保存半年，或室温下保存3个月。

 

2、原种培养：原料可用木屑或棉籽皮。木屑培养基配方：木屑78%、麦麸或米糠20%、糖1%、石膏1%。棉籽皮培养基配方：用50公斤棉籽皮加土豆浸出汁水3%（1.5公斤土豆切成泥煮沸30分钟的滤液），糖0.1%、硫酸镁0.1%。

 

做法：培养料加水拌均匀，湿度以用手紧握料，指缝内见水珠而滴不下来为宜，一般料水比1:1.2-1.3。然后装瓶，装瓶方法是边装边将瓶轻轻地抖动，使瓶上下部紧密适中，装至瓶肩部将料压平，洗净瓶口内外的培养料，加棉塞、包纸捆好放进高压消毒锅内进行灭菌，在1.5公斤压力下灭菌一小时。冷却后，在无菌操作条件下接种。将试管中母种接入瓶中，一支母种可接4-5瓶原种，接种后置于25℃恒温条件下培养一个月左右菌丝可长满瓶，即为原种。

 

3、栽培种培养：栽培种的制备实际上就是原种进行一次扩大培植。栽培种木屑培养基的配方与原种培养的配方相同，棉籽皮培养基的配方也同原种培养的配方。装瓶后灭菌，在无菌条件下，把原种菌种接入栽培种瓶内。一瓶750毫升原种可接80-100瓶栽培种。接种后置于25℃恒温条件下培育一个月左右，长满瓶后即可播种。在培养原种和栽培种时，接种后每隔2-3天要检查一次，直至菌丝长满料面后每周检查一次。拣出有杂菌污染的菌种，并远离培养室处理掉。