一、液体培养基配方:葡萄糖 20克 蛋白胨 10克 硫酸镁 0.5克 硫酸二氢钾 1克 水 1000ml
二、液体培养基的制作步骤:
1、称量、溶解
按配方称量药品,将药品置于烧杯中加水,玻璃棒搅匀。
2、分装
分装三角瓶时避免培养液黏住瓶壁口,用漏斗进行分装,三角瓶装料系数60%。
3、加棉塞
棉塞大小,松紧度要适中,一般塞入3-4厘米。
4、装锅灭菌
塞好棉塞的三角瓶用双层报纸包扎好,装入灭菌锅,盖上报纸,排气后,待温度升至121℃开始计时,温度控制在121—123℃,维持50min。
5、烘棉塞
当压力降至0.05MPa时带压进入无菌室,当压力即将降至零时开始放气,打开锅盖拿出报纸,将锅盖嵌一小缝,以此来烘干棉塞, 维持40—50min。
6、冷却
取出三角瓶放在超净工作台或接种箱中,冷却后进行接种。
液体菌种生产与固体培养不同,是以液体做培养基,通过多级发酵培养得到菌液,发酵菌液中含有大量的菌丝体,可直接做液体菌种。
目前,液体菌种发酵生产的工艺流程有:一是摇瓶培养工艺,即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子;二是深层发酵罐培养工艺,即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。少量可用摇瓶震荡培养,大量的用发酵罐通气培养。