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    秀珍菇液体菌种制备技术

    发布时间:2020-06-01

      来源:中国食用菌商务网

        一、工艺流程
        母种→原种(液体摇瓶)→生产种(罐体发酵)→料棒接种
        二、母种的制备
        1、母种培养基配方
        马铃薯(去皮)20%,葡萄糖2%,琼脂2%,水1 000毫升,pH值5.5~6。
        2、母种的制备及注意事项
        按配方准确称取原料,加热煮沸最后定容,分装试管,装入量约为试管长度的1/4~1/5,塞好棉塞。使用高压灭菌锅灭菌,在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时,注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。灭菌后,待培养基温度下降至60℃时,将成把的试管摆成斜面。注意,不要让培养基粘湿棉塞。
        要严格按照无菌操作规程进行接种,然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10~15天。
        三、原种的制备
        1、原种培养基配方
        马铃薯(去皮)20%、麦麸3%、葡萄糖2%、蛋白胨3‰、磷酸二氢钾2‰、硫酸镁1‰。
        2、原种的制备及注意事项
        马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟,过滤定容,加入其它原料,全部溶解后装入三角瓶。三角瓶在使用前除清洗之外,还要进行空灭,灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。每个瓶中放入5~10粒玻璃球(直径0.5cm),用棉塞塞紧瓶口,再用牛皮纸包裹后扎紧。使用高压灭菌锅灭菌,在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。
        冷却后进行无菌接种,然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。摇床培养时,温度25℃,转速140转/分钟,培养时间72~96小时。
        四、生产种的制备
        1、生产种培养基配方
        马铃薯(去皮)20%、麦麸2%、蛋白胨3‰、葡萄糖2%、磷酸二氢钾1‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂2~3g、酵母膏0.5‰、消泡剂1‰。
        2、生产种的制备
        (1)清洗罐体
        发酵罐在每次使用后都必须进行彻底的清洗,去除罐内残存的菌球、菌块料液等杂物,保证罐内洁净。
        (2)配制原料
        按照生产种培养基配方准确称取各种原料。马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟,过滤定容,再加入其它原料及消泡剂。
        (3)灭菌
        将盛有培养基质的发酵罐推进灭菌仓,通入蒸汽进行灭菌,控制温度在121℃左右、压力为0.11Mpa,灭菌1个小时。
        (4)冷却
        培养基灭菌完毕后,开启灭菌仓,将发酵罐推进冷却室进行降温,当温度降至25℃时即可进行接种操作。
        (5)接种
        将发酵罐推到层流罩下,先用酒精喷灯发酵罐接种口消毒,再迅速打开原种瓶并用喷灯将瓶口消毒,打开接种口阀门,将菌种注入发酵罐,然后迅速关闭接种阀门。
        (6)恒温培养与观察
        接种结束后将发酵罐推到培养区,连接通气阀等。通过进气阀和排气阀将通风量调节至1:0.5V/V~1.2V/V(料液体积/空气体积)。调节罐压保持在0.02Mpa~0.04Mpa。培养温度控制在25℃左右。
        接种24小时以后,每隔12小时可从接种口取样1次,观察菌种萌发和生长情况。采用显微镜,低倍、高倍、油镜,观察菌丝生长状况和有无杂菌污染,发现异常及时处理。
        菌种恒温培养7天左右即可使用接种栽培袋。如果液体生产种不能立即使用,可以在12~15℃条件下暂时保存2~3天。(来源:菌农网)

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