猴头菇菌丝在22~25℃条件下培养，细胞原生质浓，生命力强，也不会提早形成子实体。温度高于28℃，菌丝容易老化；低于20℃，菌丝未长透培养料就会形成子实体。子实体形成后，瓶口或袋口必须打开。猴头菇菌丝生长对空气的要求不高，每天开窗1~ 2次，每次0.5小时即能够满足菌丝生长需要。瓶内或袋内的空气可满足猴头菇菌丝前期生长的需要，但菌丝生长量和生长速度达到一定程度后，袋内二氧化碳含量往往已超过了猴头菇菌丝的承受限度，菌丝就不能继续生长，此时要将瓶口或袋口的绳子解开，使之出现一小缝，使空气进入瓶或袋内，使菌丝正常生长。菌丝体培养期间空气相对湿度为65~70%为好，空气湿度过大容易滋生杂菌；子实体形成期间，空气相对湿度应为80~90%。猴头菇菌丝生长不需要光照，在完全黑暗的条件下菌丝可以正常生长。